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深圳市科軟科技有限公司酶標洗板機_全自動洗板機_溫控箱_孵育儀_立式洗板機供應

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深圳科軟KR仿手工甩干式免拍板洗板機之酶活力測定測定條件的影響

發布于:2014年01月25日 來源:springcrossstitch.cn
[摘要]酶對溫度的變化極敏感低溫時酶的活性非常微弱,隨溫度逐步升高, 酶的活性也 逐步增加; 當溫度升至50 ~ 60 T 以上時, 酶的活性迅速下降, 甚至失活, 即使再降溫,也多 不能恢復酶的活性,這是因為溫度對酶促反應有雙重影響。

科軟仿手工甩干式全自動洗板機是傳統洗板機和傳統甩干機的有機組合的一體機。相對傳統洗板機而言,其最大特點是:1、不用人工拍板;2、不會堵針;3、故障低;4速度快。

       不吸液:刪除吸液針等吸液系統,利用旋轉和重力去液。

       無污染:水平放板,旋轉向下甩液,保證最大程度去液。獨特鍋底狀接液設計,極難反濺。獨有的防污染預處理洗板程序。

       免拍板:微孔內無殘留,洗好后不用人工拍板。免除拍板給環境和使用者造成的不利影響。

       不堵孔:無吸液針,極大地降低堵孔風險。注液針防堵孔處理,實現注液針不堵孔。閑時管路自動清洗,避免結晶堵塞。開關機自動維護,保證管路內暢通無阻。

       不撞針:注液針不移動,與微孔板保持足夠距離,有效保護酶標板和孔內包被。

       可條洗:每塊板可以任選條數進行清洗,節省洗液,保護環境。

       速度快:一次可洗16塊板,KR306洗好6塊板約4分鐘。

二、測定條件的影響
      酶活力可受測定時溫度、 p H、 底物濃度、 激活劑、 抑制劑等因素影響,下面將各個討論。
(一)溫度
        1.溫度的選擇酶活力測定時溫度的選擇應根據該酶的穩定性及實驗條件來決定。  如 37 T 較 25 $ 及 30 t 可加速酶的變性失活以及底物的破壞,對不穩定的酶( 如酸性磷 酸酶) 以及活力較低需要較長時間保溫的酶就不適合, 但 37 X .的反應速度快, 單位時間 內反應物的變化量較大,測定的靈敏度增加, 在需要變化一定量的反應物時,保溫時間可 縮短。對自動分析儀來說, 由于酶反應體系處于較密閉的環境中,與外界空氣接觸較少,  溫度變動和酶氧化失活的機會較少, 故采用37 T 可發揮上述優點。對地處南方、 天氣炎 熱而又缺少空調的實驗室, 夏天的室溫可高達3 0尤以上, 采用3 7弋保溫反應比較方便易 行。但對室溫低于30 T 的實驗室, 或反應體系敞開,溫度容易變動的手工操作或連續監 測的恒溫裝置來說, 2 5 弋或30 T 可使單位時間內的散熱減少,使溫度便于恒定。國際臨 床化學聯合會(IFCC)建議30 t 作為參考方法的標準溫度。酶反應過程中溫度必須保持恒定,差異最好不超過± 0 . 1弋,因在2 5 ~ 3 7  T 的范圍 內,每升高1  ^反應速度約增加8% 。樣品和底物應預溫至測定溫度后再互相混合, 開始 反應。

       2.酶對溫度的變化極敏感低溫時酶的活性非常微弱,隨溫度逐步升高, 酶的活性也 逐步增加; 當溫度升至50 ~  60 T 以上時, 酶的活性迅速下降, 甚至失活, 即使再降溫,也多 不能恢復酶的活性,這是因為溫度對酶促反應有雙重影響。加熱可促使化學反應速度,但 加熱也能使酶蛋白變性失活, 降低催化反應。因而酶促反應必須在一定的溫度范圍內進 行。能使酶活性達到最大時的反應溫度稱酶的最適溫度。人體內大多數酶的最適溫度為 37 T 左右。僅有極少數酶能耐稍髙的溫度,例如胰蛋白酶在加熱至1 0 0尤后,再恢復至 室溫, 仍有活性。最適溫度不是酶的特征性常數,它可以隨反應時間的長短而改變, 酶促 反應時間較長時, 最適溫度較低;反之, 最適溫度則較高。酶在低溫下活性受到抑制, 但低 溫一般不破壞酶的結構,當溫度回升時,酶又可恢復其活性, 低溫可大大延緩酶變性的速 度。因此臨床上用的酶制劑和血清標本均放在冰箱保存。
       (二)p H 的 影響溶 液的 p H 對酶活性影響很大, 在一定p H 范圍內酶才有催化活性。  在某一  p H 時酶的催化活性最大,此 p H 稱為酶作用的最適p H。人體內大多數酶的p H 接 近中性(pH 6 ~ 8 ),各種酶的最適p H 都不同,如胃蛋白酶的最適p H 為 1.5 ~ 2 . 5, 胰蛋白 酶的最適p H 為 8 ,唾液淀粉酶的最適p H 為 6. 8 , 堿性磷酸酶可高至p H  10.5。酶的最適 p H 也不是酶的特征性常數, 可受底物濃度、 反應溫度等因素影響而有所改變,如尿素酶在 醋酸、 檸檬酸和磷酸3 種緩沖液中的最適PH 分別為6.   3 、 6.7 和7 .3。有些底物本身具有緩沖液作用, 如轉氨酶底物氨基酸也有一定的緩沖作用。
      p H 對酶催化活性的影響,主要原因是PH 能改變酶分子的電離狀態;若底物是電解 質, 則也影響底物分子的電離。只有在最適p H 時, 酶分子與底物分子處于最合適的電離 狀態,二者才能結合生成大量的中間產物,所以反應速度最快。若偏離最適p H ,酶的活性 中心不能充分暴露, 酶與底物結合減少, 酶促反應速度隨之減慢。過酸或過堿時還可以使 酶蛋白變性, 失去活性。p H 對酶反應影響的曲線呈“ 鐘型” 。