目前市場在售的有ABI,Beacon,Roche幾個國外品牌,國產品牌西安天隆科技生產的價格和技術上優勢最大
? Taqman 技術:該技術以美國 ABI 公司為代表。 PCR 擴增時,在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針。該探針為一直線型的寡核苷酸,兩端分別標記一個熒光報告基團和一個熒光淬滅基團,探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收, PCR 儀檢測不到熒光信號; PCR 擴增時(在延伸階段), Taq 酶的 5' - 3' 外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條 DNA 鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與 PCR 產物形成完全同步,這也是定量的基礎所在。
實時熒光定量PCR儀 基因擴增PCR儀
? Beacon 技術:該技術以美國人 Tagyi 為代表。也是加入了熒光探針,但它是 環狀的寡核苷酸探針,分別由莖部和環部組成, 兩端分別標記 熒光報告基團和熒光猝滅基團,在無靶序列的情況下,探針始終是環狀,報告基團的熒光被猝滅基團猝滅,使熒光檢測儀檢測不到熒光信號;而在有靶序列時,即在 PCR 的退火階段探針與靶序列結合,使熒光報告基團和猝滅基團分開,這樣熒光儀可以檢測到熒光,熒光信號的強弱代表了靶序列的多少。 檢驗地帶網
? FRET 技術:該技術以 Roche( 羅氏公司 ) 為代表。它的基本原理是:兩條直線型寡核苷酸探針,其中一條的 3 ‘端標記熒光激發基團,另一條的 5 ' 端標記熒光檢測基團,在無靶序列的情況下,兩條探針分開,無法進行能量的傳遞,這樣熒光儀不能檢測到熒光信號;而當有靶序列時,即在 PCR 的退火階段兩條探針與靶序列結合,使得兩條探針上的熒光基團可以進行能量的傳遞,這樣就可以檢測到熒光信號,熒光信號的強弱代表了靶序列的多少。